Біофізика складних систем
Структура за темами
-
Дисципліна «Біофізика складних систем» є базовою нормативною дисципліною для спеціальності “Молекулярна фізіологія та біофізика”, що читається в 1 та 2 семестрах в обсязі 6 кредитів (за Європейською Кредитно-Трансферною Системою ЕСТS), обсягом 180 годин.
Мета дисципліни – сформувати загальні знання про закономірності організації та функціонування складних біологічних систем.
Курс присвячений вивченню біофізичних механізмів діяльності декількох систем в організмі людини. Серцево-судинна, шлунково-кишкова та нервова системи розглядаються на всіх рівнях їх функціонування від їх ролі в організмі, через функціонування різних спеціалізованих клітин, що складають їх тканини до молекулярних механізмів, що лежать в основі роботи клітин. Курс зосереджений на загальному розумінні схожості та відмінностей у молекулярних сигнальних шляхах, важливих для роботи цих різних систем. Паралельно курс надає детальні відомості про найсучасніші біофізичні, молекулярно-біологічні та генетичні методи та підходи, що використовуються в сучасних наукових дослідженнях для вивчення клітинних та молекулярних механізмів, що опосередковують функціонуванням складних біофізичних систем.
-
Лекція 1. Методи доставки генетичних векторів.
1. Яким чином можливо доставити генетичний матеріал до клітини?
2. Трансфекція и інфекція як методи введення генетичного матеріалу до клітини.
3. Фізичні та хімічні методи трансфекції.
4. GFP як репортерний ген.
Лекція 2. Генетичні підходи у біофізичних дослідженнях.
1. Базові генетичні механізми.
2. AS ODN; сайленсин PKCalfa.
3. siRNA; зменшення експресії гіпокальцину.
4. Нокаут (KO) та нокин (KI) генів.
5. Миші з GluR2 K882A KI.
Лекція 3. Генетичні підходи у біофізичних дослідженнях (продовження).
1. Кондиціонований нокаути та зміни генному.
2. Cre-lox редагування генів
3. Хемогенетичні підходи у біофізичних дослідженнях.
4. Сайленсінг нейронів.
Завдання
На сайті компанії Addgene (https://www.addgene.org/ ) знайти вірусний вектор, що найкраще інфікував би соми нейронів (варіант А) або їх аксони (варіант Б) і приводив до експресії tdTomato (варіант 1) or ChR2 разом з YFP (варіант 2).
Завдання
Підготувати доповіді (20-30 хвилин) у формі презентацій за наступними темами:
А. Cre-lox редагування генів.
Б. Оптогенетичні підходи у нейронауках (наприклад статті в цьому огляді: Optogenetics: Keep Interpretations Light)
В. Хемогенетичні підходи у біофізичних дослідженнях (наприклад: Combining designer receptors exclusively activated by designer drugs and neuroimaging in experimental models: A powerful approach towards neurotheranostic applications).
Г. Використання генетичних підходів до сайленсінгу нейронів (neuronal silencing).
Д. Трейсинг моносинаптичних зав’язків (наприклад: Monosynaptic Circuit Tracing with Glycoprotein-Deleted Rabies Viruses and other approaches).
Е. Двійні та трійні трансгенні тварини.
Ж. Методи генної інженерії, що базуються на системі CRISPR/Cas9 (наприклад: Genetically Engineering the Nervous System with CRISPR-Cas).
З. Аденоасоційовані віруси, як сучасна технологія біофізичних досліджень.